1. A260/A280、A260/A230比值受溶液酸碱度及离子强度的影响，如酸溶液会使A260/A280比值降低，低离子强度和低 pH 溶液会增加 280 nm 处的光吸收值。因此必须确保空白检测和溶解样品所用Buffer的离子浓度和pH值一致。
2. 浓度接近2 ng/μl浓度的样品可能会导致不可靠的260/280和/或260/230的比值。
3. 样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素，由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒，尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在会干扰测试效果。样品的浓度不能过低，或者过高(超过光度计的测试范围)。
4. 样品混合要充分，否则吸光值太低，甚至出现负值；混合液不能存在气泡，空白液无悬浮物，否则读数漂移剧烈。样品混合不均匀会直接导致检测不确定，重复性低。
5. 样品检测上样量不能太少，必须能够保证能后连接上下两根光纤形成光柱，从而使得检测正常进行。
6. 样品台清洁，在检测前，检测后以及连续使用仪器30分钟后均需要对上下接触样品的部位用双蒸水或纯水擦拭。
7. 切忌不可用喷壶在样品台上喷射，以防液体液体进入仪器内部造成损坏。
8. 切忌不可用洗涤剂或异丙醇清洁基座。
9. 仪器放置位置应当远离通风口，以免液滴蒸发太快导致浓度读数偏大。
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