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在生物学中紫外可见分光光度计有哪些应用

更新时间:2018-12-03      点击次数:955
   紫外可见分光光度计在生物学的应用(application)分析中, 常见的有蛋白质含量检测;一般是在蛋白质的吸收峰上作吸光度测定(gage)。分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器,由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统等组成。因为蛋白质对紫外光的主要吸收波长为280nm, 所以, 采用光度测量模式(pattern), 将仪器的波长GOTO 到蛋白质的**大吸收峰波长280nm 上, 测试其吸光度大小, 就可完成对蛋白质的定量检测。

  目前(Nowadays), 紫外可见分光光度计的应用主要是在定量分析方面。紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。先从生命科学领域(domain)的应用来介绍。紫外可见分光光度计在生命科学中应用非常广泛。**主要的是以下5 个方面。

  1. 蛋白质(protein)分析工作中的应用

  紫外可见分光光度计在蛋白质的分析(Analyse)中, **主要的是作蛋白质含量检测;一般是在蛋白质的吸收峰上作吸光度测定。可见分光光度计可以测量和记录其吸收程度(吸光度)。因为蛋白质对紫外光的主要吸收波长为280nm, 所以, 采用光度测量模式, 将仪器设备的波长GOTO 到蛋白质的**大吸收峰波长280nm 上, 测试其吸光度大小, 就可完成对蛋白质的定量检测。

  2. 核酸分析(Analyse)工作中的应用

  紫外可见分光光度计在核酸(Acerbity)分析中的应用(application), 主要是用来对核酸的定量检测; 因为核酸的吸收峰在260nm。我们只要采用光度测量模式, 将紫外可见分光光度计的波长GOTO 到核酸的**大吸收峰260nm 上, 测试其吸光度大小就是了。

  3. 氨(化学式:NH3) 基酸分析工作中的应用

  紫外可见分光光度计在氨(化学式:NH3) 基酸(Acerbity)分析中的应用, 主要是用来对氨基酸的定量检测。因为氨基酸对紫外光的主要吸收波长为230nm, 所以, 我们只要采用光度测量模式(pattern), 将紫外可见分光光度计仪器的波长GOTO 到氨基酸的**大吸收峰230nm 上, 就可测试其吸光度大小, 从而计算出氨基酸的含量。但是, 因为氨基酸分析时, 一般是将它溶合在水中, 而水在230 nm 附近有很多干扰吸收线, 所以, 在用紫外可见分光光度计对氨基酸分析检测时, 要注意防止(fáng zhǐ)干扰的问题。此外, 还需注意: 只有少数氨基酸有紫外吸收, 多数氨基酸无紫外吸收或很弱, 测定(gage)时要衍生(释义:演变而产生)化后再测。

  4. 糖类分析测试(TestMeasure)工作中的应用(application)

  紫外可见分光光度计在糖的分析(Analyse)中, 主要是作定量检测(检查并测试)。因为糖对紫外光的主要吸收波长为218nm, 所以, 对糖类进行分析时, 只要采用光度测量模式, 将紫外可见分光光度计仪器的波长GOTO 到氨基酸(含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称)的**大吸收峰218 nm上, 就可测试其吸光度大小, 从而计算出糖的含量。

  5. 多糖(SUGAR)分析测试工作中的应用

  紫外可见分光光度计在多糖的分析中, 主要也是作定量检测(检查并测试)。因为多糖对紫外光的主要吸收波长为206nm, 所以, 我们只要采用光度测量模式, 将紫外可见分光光度计仪器的波长GOTO 到多糖的**大吸收峰206 nm 上, 就可测试(TestMeasure)其吸光度大小, 从而计算出多糖的含量。

  但是多糖的分析难度很大。因为, 在206 nm 处的时候, 光源(氘灯) 的能量已经很弱, 仪器光学系统的能量输出也很低, 光电倍增管的灵敏度(Sensitivity)也很低, 206nm 左右的干扰也很大。所以, 用紫外可见分光光度计作多糖的分析是很难的事, 目前(Nowadays)许多科学(science)家正在研究中。

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