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紫外可见分光光度计的用途主要归纳为以下几点
一、鉴定物质。用来测量待测物质对可见光的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计;紫外可见分光光度计用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度,也可以测定细菌细胞密度。
二、待测物质是标准物及标准图谱对照进行分析。
三、比较zui大吸收波长吸收系数的一致性。
四、物质的纯度检验。
五、推测化合物的分子结构及构成。
六、判定络合物的组成及稳定常数的测定。
紫外可见分光光度计分析就是根据物质的吸 收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其 *的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或 测 定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。
紫外可见分光光度法的定量分析基础是朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律。朗伯定律是说明光的吸收与吸收层厚度成正比,比耳定律说明光的吸收与溶液浓度成正比;如果同时考虑吸收层厚度和溶液浓度对光吸收率的影响,即朗伯-比耳定律。
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